Proteinase K (recombinant), PCR grade

貨號(hào)/規(guī)格：E1019-A/1 mL; E1019-B/1 mL × 5

濃度：≥ 600 U/mL (~20 mg/mL)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

蛋白酶K是一種能夠打開脂肪族、芳香族或疏水氨基酸羧基端肽鍵的內(nèi)分解酶。蛋白酶K屬于絲氨酸蛋白酶家族。本品最小可水解四肽。

產(chǎn)品組成

儲(chǔ)存條件

保存于-20°C。

來源

重組畢赤酵母菌株，含有來自Tritirachium album的克隆基因。

單位定義

一個(gè)單位是指使用變性血紅蛋白作為底物，在37°C下1分鐘內(nèi)釋放出對(duì)應(yīng)于1μmol酪氨酸的Folin陽(yáng)性氨基酸和肽所需的酶量。在以下混合物中測(cè)定酶活性：0.08M磷酸鉀（pH 7.5），5M尿素，4mM NaCl，3mM CaCl ₂和16.7mg / mL血紅蛋白。

特點(diǎn)

? 即用型溶液

? 兼容廣泛的反應(yīng)條件

適用范圍 

? 從鼠尾中分離基因組DNA

? 從培養(yǎng)細(xì)胞中分離基因組DNA

? 在從組織或細(xì)胞系分離DNA和RNA的過程中清除DNase和RNase

? 確定酶的位置  

? 改善PCR產(chǎn)物的克隆效率  

抑制與失活

? 苯基甲基磺酰氟和氟化二異丙基磷酸酯完全抑制該酶。

? 蛋白酶 K 不會(huì)被金屬螯合劑、硫醇反應(yīng)性試劑或特定的胰蛋白酶和糜蛋白酶抑制劑滅活。

注意事項(xiàng)

? 蛋白酶K的推薦工作濃度為0.05至1mg/mL。0.2至1%的SDS或1至4M的尿素能夠提升酶活  

? Ca²⁺能夠保護(hù)蛋白酶K抵抗自分解作用，增加熱穩(wěn)定性并能夠調(diào)節(jié)蛋白酶K底物結(jié)合位點(diǎn)的功能  

? 在很寬的pH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定：pH4.0至12.5，最佳活性范圍為pH 7.5至8.0  

? 在50至55°C具有最優(yōu)的活性

? 在65°C以上溫度迅速發(fā)生變性

本品僅供科學(xué)研究使用。